诊断学理论与实践 ›› 2003, Vol. 2 ›› Issue (03): 47-48+52.doi: 10.16150/j.1671-2870.a0084
曹文俊,郑岚,黄宇闻,樊绮诗
出版日期:2003-06-25
发布日期:2003-06-25
Online:2003-06-25
Published:2003-06-25
摘要： 目的:建立血浆丙型病毒性肝炎病毒(HCV)核酸的稳定保存方法,提高荧光定量聚合酶链反应(FQ鄄PCR)检测的准确性。方法:HCV混合血浆以TRIZOL提取病毒核酸,分别保存于70%乙醇溶液及溶解于焦碳酸二乙酯(DEPC)水中,在4℃放置不同时间后,以FQ鄄PCR检测HCVRNA拷贝数。HCVRNA冻干质控品溶解于DEPC水并提取核酸后同时测定作为对照。另外,对保存的HCVRNA稀释后作线性分析。结果:未提取核酸的病毒血浆及70%乙醇溶液中的HCVRNA在4℃保存8d后,病毒核酸拷贝数无明显改变。HCVRNADEPC水溶液在4℃放置30min后即发现拷贝数降低,5h后下降为零。质控品测定值无明显降低。在70%乙醇溶液中保存的HCVRNA稀释后测定值具有线性(r=0.9991)。结论:病毒在血浆及70%乙醇溶液中保存,其核酸可以在4℃稳定保存至少8d并具有良好的线性。病毒核酸DEPC水溶液在4℃易发生降解。
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