目的:探索BALB/c小鼠肝星状细胞(HSCs)分离、纯化的可行方案,并评价依该法分离所得HSCs的生物学特性。方法:经肝门静脉先用不含钙镁离子的Hank液充分灌洗,再以浓度为1mg/mL的Ⅳ型胶原酶灌注BALB/c小鼠肝脏。取肝后,完整分离后碾碎,37℃水浴振荡30min,Percoll连续密度梯度(60%)离心法分离、纯化HSCs,苔盼蓝染色检测HSCs活性,结蛋白免疫细胞化学鉴定HSCs,光镜观察体外培养HSCs的形态学变化。结果:纯化后每只小鼠HSCs收获量约为(5.5±0.4)×105个,HSCs纯度>90%,HSCs细胞活率>90%。结论:本实验建立的的分离纯化方案可获得高纯度高活率的小鼠HSCs。
张强, 陈曦, 苏畅, 张正筠, 杨军, 韦瑶, 周光文, 李宏为,
. 小鼠肝星状细胞的分离、培养及鉴定方法[J]. 外科理论与实践, 2009
, 14(01)
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DOI: 10.16139/j.1007-9610.a2173