组织工程与重建外科杂志 ›› 2016, Vol. 12 ›› Issue (2): 107-136.doi: 10.3969/j.issn.1673-0364.2016.02.005
高宇,汪景,余庆雄,单圣周,李青峰
GAO Yu,WANG Jing,YU Qingxiong,SHAN Shengzhou,LI Qingfeng
摘要: 目的 明确机械牵张刺激下大鼠皮肤再生相关基因表达谱的变化,并筛选出其中的关键基因。方法 建立大鼠皮肤扩张模型,以未扩张皮肤为对照,以注水量不同分组取材。分别是:对照组(con)、扩张器最终注水60 mL组(exp60)、扩张器最终注水120 mL组(exp120)、扩张器最终注水180 mL组(exp180)。取材后一部分样本切片行免疫荧光染色,荧光标记增殖标记物Ki67,绘制皮肤细胞增殖曲线。另一部分样本行基因芯片检测,检测mRNA表达谱的变化,并利用t检验和差异表达的倍数变化(FC值)筛选出关键基因。筛选出皮肤再生的关键基因后,用PCR方法验证以确认该基因的表达量,及其与皮肤增殖之间的关系。结果 免疫荧光染色显示,增殖标记物Ki67在各组的表达量由高到低依次是:con、exp180、exp60和exp120。本研究筛选出不同机械牵张刺激下大鼠皮肤再生的11个差异基因,分别为:Myh1、Myh2、Myh3、Myh4、Car6、Pi15、Apt12a、Mt1a、Cthrc1、Rsad2和IGF-BP5。其中IGF-BP5和对照组的皮肤内表达相比为下调基因;PCR验证得出,IGF-BP5在各组的表达量由高到低依次是:exp120、exp60、exp180和con。结论 机械牵张刺激下,随着扩张时间及扩张量的增加,大鼠皮肤再生呈现早期皮肤细胞增殖加速,中期增殖活跃,后期增殖减缓的趋势;且IGF-BP5可能为影响机械牵张刺激下大鼠皮肤再生的关键基因。
中图分类号: