论著

聚酰胺-胺型树状聚合物介导基因转染的实验研究

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  • 上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科

网络出版日期: 2020-07-23

Experimental Study of Gene Transfer Mediated by Polyamidoamine Dendrimers

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Online published: 2020-07-23

摘要

目的 探讨聚酰胺-胺型树状聚合物(PAMAM)作为基因载体,体外转染成纤维细胞的可行性.方法 ①将pEGFP与PAMAM按不同电荷比混合,通过原子力显微镜(AFM)对PAMAM和PAMAM-pEGFP复合物进行粒径、形态的表征;凝胶电泳实验和Zeta电位实验检验PAMAM与pEGFP质粒在不同电荷比时形成复合物的能力;通过DNA共沉淀试验检测不同电荷比下PAMAM对质粒pEGFP的包封率.②将不同电荷比的PAMAM-pEGFP复合物转染至小鼠胚胎成纤维细胞系,48 h后荧光显微镜下观察转染情况.③CCK-8实验检测转染后细胞的增殖活性.结果 PAMAMpDNA复合物的粒径约10 nm.PAMAM在电荷比大于2时就能有效包裹质粒.随电荷比的增加,复合物的Zeta电位增加,在溶液中的稳定性和分散性也提高.包封率在电荷比为4∶1时达95%.转染效率随电荷比的增加呈增高趋势,其中在4∶1和6∶1时转染效率达到最高.细胞毒性与电荷比有关,电荷比大于6∶1时,PAMAM对细胞生长有毒性作用.结论 PAMAM纳米载体可安全有效地介导基因转染,是一种理想的基因递送系统.

本文引用格式

王雪,王丹茹 . 聚酰胺-胺型树状聚合物介导基因转染的实验研究[J]. 组织工程与重建外科杂志, 2011 , 7(5) : 244 -247,253 . DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2011.05.002

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