论著

大鼠小肠上皮类器官单位的分离培养鉴定

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  • 上海第二医科大学附属新华医院小儿外科;上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室;上海第二医科大学附属新华医院病理科

网络出版日期: 2020-07-23

Isolation and Identification of Intestinal Epithelium Organoid Units of Rat

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  • Department of Plastic & Reconstructive Surgery, Shanghai Xinhua Hospital, Shanghai 200092, China; Department of Plastic & Reconstructive Surgery, Shanghai 9th People’s Hospital, Tissue Engineering Research Center of Shanghai Second Medical University, Shanghai 200011,China

Online published: 2020-07-23

摘要

目的 采用机械分离和酶消化相结合的方法分离小肠上皮类器官单位(IOUs),并进行形态及功能鉴定,建立稳定的分离培养技术.方法 采用机械法剪碎小肠组织,中性蛋白酶和胶原酶联合消化分离组织碎片,差速沉淀法获得IOUs,通过相差显微镜观察IOUs形态,组织学、免疫组化证实其增殖特性及上皮刷状缘完整性,原代二维培养观察IOUs体外增殖及细胞群体组成.结果 分离的IOUs大部分形态完整,PAS染色显示连续的刷状缘,并可见杯状细胞,PCNA染色阳性并呈梯度改变,IOUs体外培养可见构成小肠的各胚层细胞.结论 采用机械分离和酶消化相结合的方法可以得到形态完整、增殖活跃的IOUs,有望为组织工程小肠构建提供种子细胞.

本文引用格式

周莹,胡学庆,周广东,徐福,姚晓虹,施诚仁 . 大鼠小肠上皮类器官单位的分离培养鉴定[J]. 组织工程与重建外科杂志, 2005 , 1(4) : 214 -216 . DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.a026

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