诊断学理论与实践 ›› 2014, Vol. 13 ›› Issue (06): 616-619.doi: 10.16150/j.1671-2870.a0831
张丽, 蒙国宇,
出版日期:2014-12-25
发布日期:2014-12-25
Online:2014-12-25
Published:2014-12-25
摘要： 目的:建立并分析获得足量的沙门菌黏合素SafD蛋白的方法 ,以用于相关的结构、功能及应用研究。方法:通过分子克隆技术分别构建原核表达质粒SafD(31-156)+pet15b和SafD(31-156)-DSC+pet15b,将测序正确的重组质粒转化到大肠埃希菌BL21,用异丙基硫代半乳糖苷进行诱导表达,并利用蛋白纯化技术纯化蛋白。结果:SafD(31-156)+pet15b重组克隆所表达的蛋白降解,该克隆在后续的研究中不可用;而SafD(31-156)-DSC+pet15b重组克隆所表达的蛋白很稳定,经纯化得到纯度约为95%的目的蛋白,蛋白量约为1 mg/L,可用于后续的结构、功能及应用研究。结论:利用大肠埃希菌BL21细胞表达并纯化了重组沙门菌黏合素SafD蛋白,为进一步研究SafD的结构和功能奠定了基础。
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