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沙门菌黏合素SafD基因的克隆表达及纯化

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  • 上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室;

网络出版日期: 2014-12-25

摘要

目的:建立并分析获得足量的沙门菌黏合素SafD蛋白的方法 ,以用于相关的结构、功能及应用研究。方法:通过分子克隆技术分别构建原核表达质粒SafD(31-156)+pet15b和SafD(31-156)-DSC+pet15b,将测序正确的重组质粒转化到大肠埃希菌BL21,用异丙基硫代半乳糖苷进行诱导表达,并利用蛋白纯化技术纯化蛋白。结果:SafD(31-156)+pet15b重组克隆所表达的蛋白降解,该克隆在后续的研究中不可用;而SafD(31-156)-DSC+pet15b重组克隆所表达的蛋白很稳定,经纯化得到纯度约为95%的目的蛋白,蛋白量约为1 mg/L,可用于后续的结构、功能及应用研究。结论:利用大肠埃希菌BL21细胞表达并纯化了重组沙门菌黏合素SafD蛋白,为进一步研究SafD的结构和功能奠定了基础。

本文引用格式

张丽, 蒙国宇, . 沙门菌黏合素SafD基因的克隆表达及纯化[J]. 诊断学理论与实践, 2014 , 13(06) : 616 -619 . DOI: 10.16150/j.1671-2870.a0831

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