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Atrogin-1基因过表达对肌肉细胞营养状况的影响

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  • 复旦大学附属中山医院普外科,复旦大学附属中山医院普外科,复旦大学附属中山医院普外科 上海200032,上海200032,上海200032

网络出版日期: 2020-07-25

摘要

目的:构建含Atrogin-1基因的慢病毒载体,并研究Atrogin-1过表达对骨骼肌细胞营养状况的影响。方法:PCR合成两端含酶切位点的Atrogin-1cDNA全长,酶切后多次重组使之克隆到慢病毒核心载体FG12中;经限制性酶切和测序鉴定重组载体后,用它感染小鼠成肌细胞,构建稳定株,将细胞进行分化,以Western印迹法检测Atrogin-1蛋白表达,并观察细胞形态学的变化。结果:Atrogin-1慢病毒载体中含有大小、序列正确的片段,感染该病毒的小鼠成肌细胞裂解液中能检测到Atrogin-1蛋白的高表达,且显示细胞明显萎缩。结论:成功构建了含Atrogin-1基因的慢病毒载体。该载体可使小鼠成肌细胞过表达Atrogin-1蛋白,引起肌肉细胞萎缩。

本文引用格式

袁磊, 吴国豪, 张波, . Atrogin-1基因过表达对肌肉细胞营养状况的影响[J]. 外科理论与实践, 2008 , 13(02) : 145 -148 . DOI: 10.16139/j.1007-9610.a1977

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