诊断学理论与实践 ›› 2004, Vol. 3 ›› Issue (05): 47-50.doi: 10.16150/j.1671-2870.a1956
赵缜,彭奕冰,季育华,范华骅,高莉,张玥
摘要： 目的:寻找一种安全有效的HCMV特异性淋巴细胞体外活化增殖方法。方法:分离外周血单核细胞,用白介素-4(IL-4)和粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导分化为未成熟树突细胞,流式细胞仪检测表面特征标志;从AD169感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)提取HCMV抗原,以未成熟树突细胞作抗原呈递细胞,共同刺激自体淋巴细胞的活化增殖,2d后检测TNF-α的分泌;继续刺激12d后,收获淋巴细胞作为效应细胞,以吞噬HCMV抗原的自体树突细胞作靶细胞,检测被杀伤细胞LDH的释放,估计其特异性细胞毒功能。结果:①单核细胞经IL-4和GM-CSF刺激4d分化为未成熟树突细胞,高表达CD1a(87.5%);低表达CD14(4.2%)、CD83(48.4%)、CD86(45.8%)和HLA-DR(55.4%)。②HCMV感染者的淋巴细胞经自体未成熟DC和HCMV抗原诱导2d后,细胞因子TNF-α的分泌显著增加(P<0.05)。③继续诱导12d后,部分淋巴细胞转化为HCMV特异性细胞毒T细胞,能特异性杀伤靶细胞(P<0.01)。结论:IL-4和GM-CSF可有效地促使HCMV感染者单核细胞转化为树突细胞,这些细胞能有效呈提HCMV抗原至自身淋巴细胞(HCMV感染者),并使其活化增殖。这为HCMV感染的免疫预防和治疗进一步提供了依据。
