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丙型肝炎病毒体外感染HepG2细胞模型的建立

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  • 上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室 ,上海第二医科大学附属瑞金医院检验科,上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室 ,上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室 200025

网络出版日期: 2003-02-25

摘要

目的:建立近似自然感染的丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)体外感染细胞模型。方法:将含10%HCVRNA阳性血清的接种液和HepG2细胞在37℃、5%CO2条件下共同孵育24h,再加含新生牛血清、地塞米松、胰岛素及硫酸亚铁的维持培养液,置32℃、5%CO2条件下培养,以后每3~4d传代一次,定期收集培养上清液和细胞。应用RT鄄nested鄄PCR、免疫组化及Westernblot进行病毒核酸和蛋白质的检测。结果:RT鄄nested鄄PCR法检测发现在接种病毒后第4~16天的细胞标本中可检测到HCVRNA正链,接种病毒后第4~24天的细胞标本则可检测到HCVRNA副链。通过免疫组化和Westernblot检测,病毒蛋白(NS3)能在第4天检出。结论:HCV体外感染HepG2细胞模型的建立,可望用于HCV吸附肝细胞机制研究及疫苗中和试验。

本文引用格式

徐晓刚,季育华,金根娣,陆志檬 . 丙型肝炎病毒体外感染HepG2细胞模型的建立[J]. 诊断学理论与实践, 2003 , 2(01) : 54 -56+72 . DOI: 10.16150/j.1671-2870.a0158

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