诊断学理论与实践

诊断学理论与实践 ›› 2003, Vol. 2 ›› Issue (01): 54-56+72.doi: 10.16150/j.1671-2870.a0158

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丙型肝炎病毒体外感染HepG2细胞模型的建立

徐晓刚,季育华,金根娣,陆志檬   

  1. 上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室 ,上海第二医科大学附属瑞金医院检验科,上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室 ,上海第二医科大学附属瑞金医院临床病毒研究室 200025
  • 出版日期:2003-02-25 发布日期:2003-02-25

  • Online:2003-02-25 Published:2003-02-25

摘要： 目的:建立近似自然感染的丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)体外感染细胞模型。方法:将含10%HCVRNA阳性血清的接种液和HepG2细胞在37℃、5%CO2条件下共同孵育24h,再加含新生牛血清、地塞米松、胰岛素及硫酸亚铁的维持培养液,置32℃、5%CO2条件下培养,以后每3～4d传代一次,定期收集培养上清液和细胞。应用RT鄄nested鄄PCR、免疫组化及Westernblot进行病毒核酸和蛋白质的检测。结果:RT鄄nested鄄PCR法检测发现在接种病毒后第4～16天的细胞标本中可检测到HCVRNA正链,接种病毒后第4～24天的细胞标本则可检测到HCVRNA副链。通过免疫组化和Westernblot检测,病毒蛋白(NS3)能在第4天检出。结论:HCV体外感染HepG2细胞模型的建立,可望用于HCV吸附肝细胞机制研究及疫苗中和试验。

关键词: 丙型肝炎病毒, 细胞模型, HepG2, 体外

Key words: Hepatitis C virus Cell model HepG2in vitro