目的:验证人树突状细胞(DC)分泌的外体(exosomes,EXO)负载NY-ESO-1抗原促进转基因小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)扩增及增强肿瘤杀伤效应。方法:应用人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-A2阳性健康成人的外周血分离诱导外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)来源的成熟DC,利用一系列不同速度的离心结合膜超滤的方法,从其上清中提取成熟DC分泌的EXO。人工负载肿瘤睾丸抗原NY-ESO-1于EXO之上(EXO/Ag),与聚肌胞(PolyI-C)共同免疫健康HLA-A2转基因C57小鼠,并在体系中加入EXO/Ag继续体外培养脾细胞。使用以上方法获得的脾细胞行四聚体实验,并对K562细胞及黑色素瘤细胞(对照组)行杀伤实验。结果:脾细胞中NY-ESO-1特异的CTL有所扩增,对K562肿瘤细胞有一定杀伤效应。体外实验显示NY-ESO-1特异的CTL较前大量扩增,对K562肿瘤细胞杀伤效应大大增加。结论:EXO/Ag结合PolyI-C作为新一代抗肿瘤疫苗具有良好的应用前景。