组织工程与重建外科杂志

组织工程与重建外科杂志 ›› 2005, Vol. 1 ›› Issue (4): 214-216.doi: 10.3969/j.issn.1673-0364.a026

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大鼠小肠上皮类器官单位的分离培养鉴定

周莹，胡学庆，周广东，徐福，姚晓虹，施诚仁   

  1. 上海第二医科大学附属新华医院小儿外科；上海第二医科大学附属第九人民医院组织工程实验室；上海第二医科大学附属新华医院病理科
  • 发布日期:2020-07-23

Isolation and Identification of Intestinal Epithelium Organoid Units of Rat

Zhou Ying, Hu Xueqing, Zhou Guangdong, Xu Fu, Yao Xiaohong, Shi Chengren   

  1. Department of Plastic & Reconstructive Surgery, Shanghai Xinhua Hospital, Shanghai 200092, China; Department of Plastic & Reconstructive Surgery, Shanghai 9th People’s Hospital, Tissue Engineering Research Center of Shanghai Second Medical University, Shanghai 200011,China
  • Published:2020-07-23

摘要： 目的 采用机械分离和酶消化相结合的方法分离小肠上皮类器官单位(IOUs),并进行形态及功能鉴定,建立稳定的分离培养技术.方法 采用机械法剪碎小肠组织,中性蛋白酶和胶原酶联合消化分离组织碎片,差速沉淀法获得IOUs,通过相差显微镜观察IOUs形态,组织学、免疫组化证实其增殖特性及上皮刷状缘完整性,原代二维培养观察IOUs体外增殖及细胞群体组成.结果 分离的IOUs大部分形态完整,PAS染色显示连续的刷状缘,并可见杯状细胞,PCNA染色阳性并呈梯度改变,IOUs体外培养可见构成小肠的各胚层细胞.结论 采用机械分离和酶消化相结合的方法可以得到形态完整、增殖活跃的IOUs,有望为组织工程小肠构建提供种子细胞.

关键词: 组织工程, 小肠, 上皮类器官单位, 体外培养

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