组织工程与重建外科杂志 ›› 2021, Vol. 17 ›› Issue (1): 25-.

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PAX6 基因过表达促进大鼠骨髓内皮祖细胞向角膜内皮细胞分化 #br#

  

  • 出版日期:2021-01-01 发布日期:2022-01-14

  • Online:2021-01-01 Published:2022-01-14

摘要:

目的 通过研究大鼠骨髓内皮祖细胞转染 PAX6 基因后角膜内皮细胞相关特征性基因的表达探讨其作为角膜内皮细胞移植的种子细胞的可能性

方法 采用密度梯度离心法分离出大鼠骨髓单核细胞接种到纤连蛋白铺层的细胞皿EGM-2 培养液选择培养获得大鼠骨髓内皮祖细胞通过免疫荧光染色检测 CD31、CD34、CD133、LDL、UEA-1 等骨髓内皮祖细胞基因表达情况病毒转染 PAX6 基因进入内皮祖细胞蛋白免疫印迹鉴定转染成功与否实时荧光定量 PCR 检测 AQP-1、ZO-1、ATP1A1、SNAI1、SNAI2 角膜内皮细胞相关特征性基因的表达情况结果 分离获得的细胞在选择培养基中形成类铺路石样克隆胞在选择培养基中形成类铺路石样克隆细胞间连接紧密荧光染色显示内皮祖细胞基因表达且 PAX6 基因可被成功转实时荧光定量 PCR 检测显示转染后的细胞角膜内皮细胞功能性蛋白基因表达上升纤维化蛋白基因表达下降

结论 大鼠骨髓内皮祖细胞通过过表达 PAX6 基因可被诱导向角膜内皮细胞转分化转染后的细胞具有作为角膜内皮细胞移植种子细胞的潜力

关键词: 骨髓内皮祖细胞; , 角膜内皮细胞; PAX6; , 转分化 ,

Abstract: