摘要：
目的 探讨炎症微环境作用下骨形态发生蛋白 － 细胞外信号调节激酶 ５ （ Ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎｓ －ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｉｇｎａｌ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｋｉｎａｓｅ ５，ＢＭＰｓ－ＥＲＫ５）信号通路对人牙周膜干细胞（ Ｈｕｍａｎ ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ ｌｉｇａｍｅｎｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ，ｈＰＤＬＳＣｓ）成骨分化的影响。
方法 应用组织块酶消化法分离获得原代 ｈＰＤＬＳＣｓ 并进行体外培养，应用细胞免疫荧光染色鉴定 ｈＰＤＬＳＣｓ。 将腺病毒载体介导的骨形态发生蛋白 ２（ Ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ ２，ＢＭＰ２）、ＢＭＰ７ 及 ＢＭＰ９ 蛋白（Ａｄ－ＢＭＰ２、Ａｄ－ ＢＭＰ７ 及 Ａｄ － ＢＭＰ９） 分别转染 ｈＰＤＬＳＣｓ，定性和定量检测早期成骨分化指标碱性磷酸酶（ Ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ，ＡＬＰ），茜素红染色检测晚期成骨分化指标钙盐结节沉积，ｑＲＴ－ＰＣＲ 检测成骨分化相关基因 ｍＲＮＡ 的表达。 确定 ＢＭＰ９ 对细胞成骨分化作用最强后，使用 Ａｄ－ＢＭＰ９ 转染 ｈＰＤＬＳＣｓ，检测其对 ＥＲＫ５ 磷酸化（ｐ－ＥＲＫ５）水平的影响，并加入 ＢＭＰｓ－ＥＲＫ５ 信号通路特异性抑制剂 ＢＩＸＯ２１８９ 预处理，考察对 ｈＰＤＬＳＣｓ 成骨分化的影响。 结果 早期成骨分化、成骨分化相关基因及晚期成骨分化指标均显示，Ａｄ－ＢＭＰ２、Ａｄ－ＢＭＰ７ 及 Ａｄ－ＢＭＰ９ 具有较强的 ｈＰＤＬＳＣｓ 成骨分化作用，Ａｄ－ＢＭＰ９ 促进 ｈＰＤＬＳＣｓ 成骨分化的作用最强。 在 ＥＲＫ５ 信号通路特异性抑制剂 ＢＩＸ０２１８９ 干扰下，ＥＲＫ５ 表达降低，Ａｄ－ＢＭＰ９ 的 ｈＰＤＬＳＣｓ 成骨分化作用也被抑制，且呈 ＢＩＸ０２１８９ 剂量依赖性趋势。
结论 在慢性炎症微环境下，ＢＭＰ９具有诱导 ｈＰＤＬＳＣｓ 成骨分化的作用，ＥＲＫ５ 信号通路可调节 ＢＭＰ９ 诱导的 ｈＰＤＬＳＣｓ 的成骨分化作用。
