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应用酵母双杂交技术筛选与癌性锚蛋白重复序列相互作用的蛋白

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  • 上海交通大学医学院附属第三人民医院消化内科;

网络出版日期: 2020-07-25

摘要

目的:筛选与癌性锚蛋白重复序列(Gankyrin)相互作用的蛋白。方法:构建诱饵(Bait)质粒pGB-Psmd10-1,采用β-半乳糖苷酶滤膜分析检测其自身转录活性,以Bait质粒筛选人Hela细胞MATCHMAKER cDNA文库,共转染重复验证阳性克隆,并测序鉴定。结果:成功构建Bait质粒,经验证对报告基因LacZ无自激活作用。以Bait质粒筛选人Hela细胞cDNA文库,获得83个克隆,其中5个克隆经重复验证确定为阳性克隆,测序结果显示其cDNA为Psmc4的3段不同剪接体(NM_006503.2,NM_153001.1)。结论:在人Hela细胞中,Psmc4为与Gankyrin相互作用的蛋白。

本文引用格式

包玉洁, 戴强, 杨文燕, 程芃, 王碧君, 张燕捷, . 应用酵母双杂交技术筛选与癌性锚蛋白重复序列相互作用的蛋白[J]. 内科理论与实践, 2011 , 6(04) : 295 -297 . DOI: 10.16138/j.1673-6087.a1403

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