外科理论与实践

外科理论与实践 ›› 2010, Vol. 15 ›› Issue (04): 423-427.doi: 10.16139/j.1007-9610.a2509

• 论文 • 上一篇    下一篇

视黄醇类核内受体-α基因慢病毒载体的构建及其对肝星状细胞的影响

郑永超, 孙勇伟, 吴志勇, 王争, 陈炜, 徐嘉鹏,   

  1. 上海交通大学医学院附属仁济医院普外科;
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要： 目的:通过视黄醇类核内受体-α(retinoid X receptor-alpha,RXR-α)基因慢病毒表达载体的构建,及其对肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)活化、增殖影响的研究,探讨RXR-α基因在肝纤维化中的作用。方法:①构建RXR-α基因慢病毒表达载体;②分离和体外培养大鼠HSC;③将自发活化的HSC分成3组,即正常对照组、阴性对照组和RXR-α载体组;分别将空白慢病毒载体和RXR-α慢病毒载体转染自体活化的HSC,采用Western印迹法检测各组细胞中RXR-α、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达变化,用MTT法检测各组HSC培养24、48、72及96 h后的增殖情况。结果:正常对照组及阴性对照组HSC中几乎没有RXR-α蛋白的表达,而RXR-α载体转染组的HSC中出现RXR-α蛋白的明显表达。与正常对照组及阴性对照组相比,RXR-α载体组转染的HSC中α-SMA蛋白表达量显著下降(t=3.767,P<0.05),Ⅰ型胶原蛋白表达也显著降低(t分别为10.449和10.756,P值均<0.01),同时HSC的增殖能力也显著下降(t分别为4.381和1.778,P值均0.05)。结论:RXR-α基因在HSC内的增强表达能显著抑制HSC的活化和增殖,具有潜在的抑制肝纤维化的作用。

关键词: 慢病毒载体, 视黄醇类核内受体-α, 肝星状细胞, 肝纤维化

Key words: Lentivirus vector, Retinoid X receptor-alpha, Hepatic stellate cell, Hepatic fibrosis