诊断学理论与实践 ›› 2005, Vol. 4 ›› Issue (01): 59-61.doi: 10.16150/j.1671-2870.a1932
郑佐娅,高丰厚,洪理泉,赵卫国,王鸿利
摘要: 目的:评估重组融合蛋白谷胱甘肽S-转移酶(GST)-肌钙蛋白I(TnI)(28~110aa)的实用价值。方法:诱导表达菌株BL21-PGEX-4T-3/TnI(84~330bp)表达GST-TnI(28~110aa),谷胱甘肽Sepharose-4B亲合层析柱纯化融合蛋白,经自动免疫分析仪检测其免疫反应性。采用双抗体夹心ELISA法检测稳定性,并与天然提纯心肌肌钙蛋白I(cTnI)抗原进行比较。结果:GST-TnI(28~110aa)融合蛋白表达水平高,具较高免疫反应性。在37℃条件下,GST-TnI(28~110aa)融合蛋白第3天免疫反应性仍保留60%,而人心肌提纯的cTnI在第3天免疫反应性几近丧失。结论:GST-TnI(28~110aa)融合蛋白具较高的免疫反应性,与天然cTnI相比较,重组GST-TnI融合蛋白稳定性好,有望作为cTnI测定的候选参考标准品。