诊断学理论与实践

诊断学理论与实践 ›› 2005, Vol. 4 ›› Issue (01): 59-61.doi: 10.16150/j.1671-2870.a1932

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谷胱甘肽S-转移酶-肌钙蛋白I(28～110aa)表达纯化及稳定性的初步研究

郑佐娅,高丰厚,洪理泉,赵卫国,王鸿利   

  1. 上海第二医科大学检验医学重点实验室,上海第二医科大学检验医学重点实验室,上海第二医科大学检验医学重点实验室,上海第二医科大学检验医学重点实验室,上海第二医科大学检验医学重点实验室 上海200023 ,上海200023 ,上海200023 ,上海200023 ,上海200023
  • 出版日期:2005-02-25 发布日期:2005-02-25

  • Online:2005-02-25 Published:2005-02-25

摘要： 目的:评估重组融合蛋白谷胱甘肽S-转移酶(GST)-肌钙蛋白I(TnI)(28～110aa)的实用价值。方法:诱导表达菌株BL21-PGEX-4T-3/TnI(84～330bp)表达GST-TnI(28～110aa),谷胱甘肽Sepharose-4B亲合层析柱纯化融合蛋白,经自动免疫分析仪检测其免疫反应性。采用双抗体夹心ELISA法检测稳定性,并与天然提纯心肌肌钙蛋白I(cTnI)抗原进行比较。结果:GST-TnI(28～110aa)融合蛋白表达水平高,具较高免疫反应性。在37℃条件下,GST-TnI(28～110aa)融合蛋白第3天免疫反应性仍保留60%,而人心肌提纯的cTnI在第3天免疫反应性几近丧失。结论:GST-TnI(28～110aa)融合蛋白具较高的免疫反应性,与天然cTnI相比较,重组GST-TnI融合蛋白稳定性好,有望作为cTnI测定的候选参考标准品。

关键词: 肌钙蛋白I, 谷胱甘肽S-转移酶鄄肌钙蛋白I(28～110aa)融合蛋白, 稳定性

Key words: Cardiac troponin I, Glutathione S-transferase-troponin I (28-110 aa)fusion protein, Stability