外科理论与实践 ›› 2011, Vol. 16 ›› Issue (04): 392-396.doi: 10.16139/j.1007-9610.a2724

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人结肠癌细胞株HCT116中雌激素受体β与mTOR基因相互作用的初步研究

许慈, 俞丽芬, 蔡劬, 卢君瑶, 钟捷,   

  1. 上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科;上海交通大学医学院附属瑞金医院上海消化外科研究所;
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要: 目的:探讨雌激素受体β(ERβ)在人结肠癌细胞株HCT116中的表达及其与mTOR基因的相互关系。方法:分别采用ERβ质粒转染(联合或不联合ERβ激动剂)、siRNA干扰mTOR基因、5-氮脱氧胞苷(5-aza-dC)处理HCT116细胞株;通过实时定量PCR法检测各处理组细胞中之mTOR、ERβ和cyclinD1的mRNA表达;蛋白印迹法检测p-mTOR、mTOR、ERβ和cyclinD1的蛋白表达。结果:HCT116细胞株转染ERβ质粒后,无论是否存在ERβ激动剂,都可明显下调p-mTOR和cyclinD1的蛋白表达水平,但是mTOR蛋白的表达却无变化。siRNA干扰细胞的mTOR基因后,ERβ表达明显增加而cyclinD1的mRNA和蛋白表达水平均下降。5-aza-dC处理后,能明显促进HCT116细胞株中ERβ的表达,mTOR基因在mRNA和蛋白水平的表达都无明显差异,但p-mTOR的蛋白水平降低,cyclinD1的mRNA和蛋白表达水平都下降。结论:ERβ和mTOR之间具有负相互调节作用;HCT116细胞中亦存在ERβ启动子甲基化的现象。这为ERβ及其特异性激动剂和mTOR抑制剂的联合应用防治结肠肿瘤提供了初步的实验依据。

关键词: 雌激素受体β, 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白, 甲基化, 结肠直肠癌

Key words: Estrogen receptor β, Mammalian target of rapamycin, Methylation, Colon cancer