外科理论与实践

外科理论与实践 ›› 2017, Vol. 22 ›› Issue (06): 520-524.doi: 10.16139/j.1007-9610.a3624

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泛素特异性蛋白酶15对结肠癌细胞上皮间质转化的影响

李翔, 史志霞, 金永军,   

  1. 杭州市红十字会医院肛肠外科;杭州市第三人民医院重症监护室;
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要： 目的:研究泛素特异性蛋白酶15(ubiquitin specific peptidase 15,USP15)对结肠癌HCT116细胞上皮间质转化的影响。方法:TGF-β_1可诱导结肠癌细胞发生上皮间质转化。采用TGF-β_1处理HCT116细胞,同时采用人USP15特异性小干扰RNA(TGF-β_1+siUSP15)转染HCT116细胞,阴性对照序列(TGF-β_1+siScramble)作为对照。采用siUSP15转染结肠癌奥沙利铂耐药细胞株(HCT116/L-OHP),然后采用奥沙利铂处理48 h。阴性对照序列(siScramble)作为对照,实时荧光定量聚合酶链反应检测USP15、E钙黏蛋白和波形蛋白mRNA表达。Western印迹检测USP15、E-钙黏蛋白、波形蛋白的蛋白表达。细胞划痕实验检测HCT116的迁移能力。CCK8法检测细胞抑制率。结果:siUSP15能有效抑制USP15在HCT116中的表达。与TGF-β_1+siScramble组相比,TGF-β_1+siUSP15组细胞中E钙黏蛋白表达上调(P<0.05),而波形蛋白表达下降(P<0.05)。细胞划痕实验显示,与TGF-β_1+siScramble组相比,TGF-β_1+siUSP15细胞的迁移能力显著下降(P<0.05)。结论:USP15在结肠癌细胞上皮间质转化过程中发挥重要作用。

关键词: 泛素特异性蛋白酶15, 结肠癌细胞, 上皮间质转化, 转化生长因子β

Key words: Ubiquitin specific peptidase 15, Colon cancer cell, Epithelial-mesenchymal transition, Transforming growth factor-β