组织工程与重建外科杂志 ›› 2021, Vol. 17 ›› Issue (4): 290-.

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Foxc2 基因对 MC3T3⁃E1 细胞成骨能力影响的实验研究

  

  • 出版日期:2021-08-01 发布日期:2022-01-29

  • Online:2021-08-01 Published:2022-01-29

摘要: 目的 探讨 Foxc2 基因对 MC3T3?E1 细胞成骨能力的影响,并初筛其下游的靶基因。 方法 将多个成骨诱导 因子作用于 MC3T3?E1 细胞,明确 Foxc2 的表达。 采用慢病毒 plenti-Foxc2 及 plenti-EGFP 转染 MC3T3?E1 细胞,构建 MC3T3?E1 Foxc2+及 MC3T3?E1 EGFP 。 检测细胞增殖、细胞周期和凋亡的变化。 采用 real-time PCR 和 Western bolt 检测成骨 生物标志物 Runx2 的水平。 通过 ALP 和 ARS 染色观察 Foxc2 过表达对成骨分化的影响。 利用 siRNA 构建 MC3T3? E1 si-Foxc2进行反向验证。 通过基因芯片和生物信息学分析,检测 MC3T3?E1 Foxc2+ 和 MC3T3?E1 EGFP 基因的整体表达谱。 结果 Foxc2 基因在成骨诱导刺激下出现表达上调。 成功构建的 MC3T3?E1 Foxc2+ 过表达细胞组,细胞增殖受到抑制, Runx2 表达上调。 利用基因芯片和生物信息学分析比较 MC3T3?E1 Foxc2+和 MC3T3?E1 EGFP的整体基因表达谱差异,初步筛 选出可能受 Foxc2 调控的成骨分化差异表达基因,如 mmp9、Ereg 等。 结论 Foxc2 基因可通过抑制 MC3T3?E1 细胞增 殖,上调 Runx2 表达,促进 MC3T3?E1 细胞成骨分化。 mmp9 和 Ereg 等基因可能参与这一成骨调控过程。 

关键词: Foxc2, 成骨分化, MC3T3?E1 细胞, Runx2