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    2013年, 第9卷, 第3期 刊出日期:2020-07-23 上一期    下一期
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    论著
    不同血清浓度对淋巴管内皮细胞培养的影响
    葛敏,蒋朝华,戴婷婷,程佳,李圣利
    2013 (3):  121-124.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.001
    摘要 ( 402 )  
    目的探讨不同浓度的血清在人淋巴管内皮细胞培养中的作用,得出最优血清浓度,优化淋巴管内皮细胞(Lymphatic endothelial cells,LECs)的培养方案。方法通过免疫磁珠法获得人LECs,将不同浓度(0%、2.5%、5%、7.5%、10%)的胎牛血清加入EGM-2培养液中,培养LECs,并通过免疫荧光、RT-PCR、流式分析、成管试验、吞脂试验等方法,鉴定LECs特异性标记及功能。结果通过免疫磁珠法获得的人LECs表达特异性指征和功能。不同浓度的血清培养液对人LECs的吞脂功能无明显影响,无血清组丧失淋巴管成管能力,7.5%血清组成管能力和增殖能力最强。结论人LECs培养过程中,血清在细胞增殖和功能保持方面具有重要作用,最适宜的血清浓度是7.5%,此浓度血清培养的细胞其增殖能力以及功能都是最优的。
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    一种从骨髓血凝块中分离间充质干细胞的方法
    李志勇,王恒湘,毕晓云,黄舒,郭子宽,郭志坤
    2013 (3):  125-128.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.002
    摘要 ( 294 )  
    目的 探讨一种从骨髓血凝块中分离培养间充质干细胞的简易方法.方法 采集肝素化骨髓标本7份,部分加入凝血酶以模拟血液凝固过程,并于0、8和16 h分别使用尿激酶或机械处理,分为尿激酶处理组、机械处理组、凝固未处理组及未凝固对照组.各组标本经氯化铵溶解红细胞后,分别进行成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)和MSC传代培养.计每组CFU-F及第0、1和2代MSC数量.流式细胞仪测定细胞表型,组织化学法检测细胞体外成骨和成脂肪能力.结果 尿激酶处理组样本CFU-F数平均为(33.71±23.54),接近于未凝固对照组样本(40.43±21.29)(n=7,P>0.05),显著高于机械法处理组(13±11.91)(n=7,P<0.01)和凝固未处理组(3.71±3.89)(n=7,P<0.01).储存8或16h后的标本,各组CFU-F形成能力下降,而未凝固对照组和尿激酶处理组数量仍显著高于另外两组(P<0.05).标本储存不同时间进行MSC传代培养,未凝固对照组及尿激酶处理组细胞数量无明显差别,但均显著高于凝固未处理组及机械处理组.各组MSC均表达CD73和CD90,不表达CD31和CD45.经特异诱导后,各组MSC均呈现碱性磷酸酶活性,细胞内出现亲油红O染料的脂肪滴.结论 对于已经凝固的骨髓标本而言,尿激酶预处理是分离培养MSC的良好途径.
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    表皮干细胞抽提物重编程脂肪干细胞表达表皮细胞表型的实验研究
    孙楠,张群
    2013 (3):  129-132.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.003
    摘要 ( 310 )  
    目的 研究富集的表皮干细胞(Keratinocyte enriched with epidermal stem cells,KSC)抽提物对重编程人脂肪干细胞(Adipose derived stem cells,ASCs)表达表皮细胞表型的影响.方法 常规方法收集表皮细胞(Keratinocyte,KC)后,应用Ⅳ型胶原差速贴壁法分别收集KSC与富集后剩余的表皮细胞(Keratinocyte enriched with epidermal stem cells left,KCL),鉴定K19和P63的阳性表达率,Gimsa染色法测定KC 、KSC、KCL的克隆形成率,分别制备KC、KSC、KCL 的细胞抽提物,作用于链球菌溶血素-O(SLO)通透处理过的原代ASCs,分别应用流式细胞仪与Western-blot测定重编程后ASCs中广谱角蛋白(Pan cytokeratin,P-CK)与ASCs的BRG1表达变化.结果 KSC与KC、KCL来源的细胞抽提物重编程ASCs的CK及BRG1表达率,均有明显统计学差异(P<0.01).结论 脂肪干细胞在表皮细胞抽提物的诱导作用下能表达表皮细胞表型,且对表皮细胞优化处理后的KSC有更加显著的重编程作用.
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    人脂肪来源干细胞与聚己内酯/壳聚糖支架的生物相容性研究
    周哲,吴稼晟,张明,赵阳,周娟,李伟,王忠,孙康,卢慕峻
    2013 (3):  133-136.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.004
    摘要 ( 296 )  
    目的 观察人脂肪来源干细胞(Human adipose derived stem cells,hADSCs)在聚己内酯/壳聚糖[Poly(e-caprolactone)/chitosan,PCL/CS]支架中的生长情况.方法 取PCL/CS浸提液培养hADSCs,CCK-8法检测细胞活力,评价支架细胞毒性.hADSCs传代扩增后,接种到PCL/CS支架上,体外培养1周、2周,裸鼠体内培养2周,HE染色观察细胞在支架上的生长情况,免疫组化HLA-I监测经裸鼠体内培养后复合支架上细胞的种属来源.结果 hADSCs在PCL/CS浸提液中可保持较高的增殖率,PCL/CS浸提液无细胞毒性.hADSCs终止于PCL/CS支架后,经过体外、内培养,hADSCs均能长人支架的空隙内,且体内培养比体外培养有更多的细胞长入支架.体外培养1周,已有细胞黏附生长在PCL/CS支架的边缘,体外培养2周后,部分细胞渗透到材料内部.体内培养2周后,大量细胞能渗透到材料内部,同时HLA-Ⅰ抗体检测发现,支架材料内部分细胞HLA-Ⅰ阳性表达,说明PCL/CS支架内该部分的细胞来源于hADSCs.结论 PCL/CS支架安全无毒,hADSCs能在PCL/CS支架上较好生长,该支架可用于组织工程膀胱的研究.
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    高迁移组蛋白1-A盒对大鼠胶原诱导的关节炎的治疗作用
    曹小芳,毕晓云,王勇奇,李志勇,陈晶砺,黄舒,郭子宽,王恒湘
    2013 (3):  137-140.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.005
    摘要 ( 295 )  
    目的 探讨高迁移组蛋白1-A盒(A-box of high mobility group protein-1,A-BOX)对类风湿性关节炎的治疗作用.方法 以胶原诱导的关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠模型为研究对象,在胶原造模4周后,进行关节炎症状评分,并将实验动物随机分为三组(每组12只),腹腔内分别注射A-BOX(每只大鼠注射0.62 mg,A-BOX组)、甲氨蝶呤(1 mg/Kg,MTX组)和生理盐水(阴性对照组),每周一次,连续治疗4周.治疗后进行关节炎症状评分、踝关节病理学及X线摄片检查.结果 所有造模大鼠均出现了关节炎症状,造模后关节炎评分为(7.25±0.70),显著高于正常大鼠(P<0.01).治疗4周后,阴性对照组症状评分为(7.77±0.44),显著高于MTX组(6.25±1.03)(P<0.05)和A-BOX组(6.12±0.99) (P<0.01).MTX组与A-BOX组无显著差异(P>0.05).病理学显示,A-BOX组滑膜增生、血管新生和炎症评分分别为(0.00±0.00),(1.14土0.69)和(1.71土0.75);MTX组分别为(0.71±0.48),(1.57±0.78)和(1.42±0.53),均显著低于阴性对照组的(2.28±0.45),(1.85±0.69)和(2.14±0.89)(P<0.05).A-BOX组未见滑膜增生,评分低于MTX组(P<0.05);两组间其他改变无显著差异(P>0.05).X线摄片A-BOX组、MTX组及阴性对照组评分分别为(1.85±1.06),(1.85±1.06)和(3.28±0.48),均有统计学差异(P<0.05).结论 A-BOX对大鼠CIA治疗作用稍优于MTX,具有药物开发前景.
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    黄芪对自体脂肪颗粒移植存活率的影响
    武承兴,王健,张波,郑丹宁,余力
    2013 (3):  141-144.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.006
    摘要 ( 375 )  
    目的 探讨黄芪对自体脂肪颗粒移植成活率的影响.方法 建立新西兰大白兔自体脂肪移植动物模型,设立实验组和对照组,实验组予以肌肉注射不同剂量的黄芪注射液.检测血液中VEGF含量,脂肪移植体剩余重量,计算移植脂肪的存活率;HE染色后镜下观察脂肪移植组织细胞形态和血管密度;血管内皮细胞Ⅷ因子免疫组化法观察新生血管生长情况及密度.结果 实验组移植脂肪组织存活率明显高于对照组;实验组血清VEGF表达水平明显高于对照组;HE染色及血管内皮细胞Ⅷ因子免疫组织化学染色显示实验组在脂肪细胞数量、形态、脂肪移植体纤维化程度及新生毛细血管密度等方面均优于对照组.结论 黄芪注射液能够显著提高新西兰大白兔自体脂肪颗粒移植的存活率.
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    大龄腭裂患者两种手术模式的临床评估
    屈文静,王永前,李海东,宋涛,吴镝,麻恒源,姜婵媛,孙敏,尹宁北
    2013 (3):  145-149.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.007
    摘要 ( 292 )  
    目的 探讨不同年龄腭裂患者的手术治疗模式,以提高大龄腭裂患者术后的腭咽闭合率和语音清晰度.方法 2010年5月至2012年4月,52例大龄腭裂患者按年龄不同分为A组(8~16岁,n=18)和B组(16岁以上,n=34),A组进行改良兰氏法同期腭咽肌瓣咽成形术,B组进行改良兰氏法同期咽后壁瓣咽成形术.所有患者术后随访10~18个月,观察创口愈合情况、语音清晰度、高低鼻音、鼻漏气及鼻咽纤维内镜检查情况.结果 语音评估显示,A组和B组患者高鼻音和鼻漏气程度均显著下降,语音清晰度提高;32例患者术后腭咽闭合完全,余20例患者术后虽仍有腭咽闭合不全,但在鼻咽纤维镜下腭咽闭合率达80%以上.结论 针对不同年龄的腭裂患者制定个体化手术方式,可显著提高腭裂患者术后腭咽闭合率和语音清晰度.
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    鼻缺损修复术中衬里组织的修复
    王盛,尤建军,王欢,徐奕昊,胡小东,刘征,田乐,范飞
    2013 (3):  150-152.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.008
    摘要 ( 332 )  
    目的 探讨鼻缺损修复术中衬里组织的修复方法.方法 自2003年1月至2012年10月,根据鼻缺损的情况,对195例各类鼻缺损患者采用局部组织翻转皮瓣、外被皮瓣远端折叠、双瓣法、预制皮瓣等方法来修复衬里,并观察术后效果.结果 所有方法衬里皮瓣均成活良好.随访6个月至5年,局部组织翻转皮瓣法最大的并发症是皮瓣挛缩导致的鼻孔狭窄、通气不良,其他方法未见明显并发症.结论 在鼻缺损的衬里修复中,需要正确评估鼻部缺损范围、程度,以及周围可利用的残留组织量,选择合适的衬里修复方法,以获得良好的手术效果.
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    透明质酸钠凝胶注射鼻整形患者的心理研究
    翁元青
    2013 (3):  153-154.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.009
    摘要 ( 251 )  
    目的 通过透明质酸钠凝胶注射改善鼻形态,减轻患者心理压力,纠正心理障碍.方法 2010年9月至2013年3月,对31例要求注射透明质酸钠凝胶进行鼻整形的患者进行问卷调查,了解患者基本社会信息,确认心理压力和心理障碍的来源.以1.0~1.5 mL透明质酸钠凝胶注射在鼻背和鼻尖部,改善鼻形态,术后定期随访1年.结果 透明质酸钠凝胶注射后,患者对鼻形态满意,随访显示,术后1~6个月患者自信心提升,心理压力缓解,心理障碍获得纠正.结论 透明质酸钠凝胶注射鼻整形能暂时纠正鼻形态不良所引起的心理障碍,缓解由此引起的心理压力.
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    封闭负压引流技术结合组织瓣移植治疗胫腓骨严重开放性骨折
    姚俊娜,杜志军,赵祚塨
    2013 (3):  155-157.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.010
    摘要 ( 316 )  
    目的 探讨封闭负压引流技术结合组织瓣移植,治疗胫腓骨严重开放性骨折的临床疗效.方法 自2009年8月至2012年8月,对21例严重胫腓骨开放性骨折,行一期清创,骨折采用外固定架固定,应用封闭负压引流技术结合组织瓣移植治疗.结果 术后随访10~36个月,所有患者骨折愈合良好,均无骨髓炎发生,功能恢复满意.结论 封闭负压引流技术能改善创面软组织条件,结合组织瓣移植修复,是治疗胫腓骨严重开放性损伤的有效方法.
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    C臂机导航下经皮椎弓根钉内固定联合对侧微创TLIF治疗腰椎管狭窄症
    杨明杰,李立钧,麻彬,潘杰,韩应超,谭军
    2013 (3):  158-160.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.011
    摘要 ( 458 )  
    目的 探讨导航辅助下经皮椎弓根钉内固定,联合对侧微创经椎间孔椎体间融合术(Transforaminal Lumbar Interbody Fusion,TLIF),治疗腰椎管狭窄症的临床应用.方法 2010年6月至2012年6月,对47例腰椎管狭窄症患者行导航下经皮椎弓根钉内固定,联合对侧微创TLIF术治疗,观察手术时间、出血量以及手术前后的VAS和ODI评分,并将经皮钉侧和开放置钉侧进行配伍对照比较.结果 平均出血量为(420±45) mL;术前VAS评分为(6.85±1.03),术后1月VAS评分为(1.88±0.79);术前ODI评分为(31.6±3.05),术后1月ODI评分为(43.1±3.23).配伍对照研究结果显示,经皮钉组A级101枚、B级9枚、C级2枚,开放置钉组A级86枚、B级21枚、C级4枚、D级1枚.经皮钉组平均置钉时间为(11.25±4.33) min,透视次数为(2.73±0.42)次,开放置钉组平均置钉时间为(15.43±5.65) min,透视次数为(4.12±0.85)次.差异均有统计学意义.结论 导航辅助下经皮椎弓根钉内固定,联合对侧微创TLIF治疗腰椎管狭窄症疗,效果显著,导航辅助下经皮钉组置钉术的准确度优于开放置钉组,透视次数和置钉时间均少于开放组.
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    MIPPO技术治疗胫骨长节段粉碎性骨折
    金海洋,陈永峰,邱述才
    2013 (3):  161-163.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.012
    摘要 ( 367 )  
    目的 探讨经皮微创接骨板技术(MIPPO)治疗胫骨长节段粉碎性骨折的临床效果.方法 自2010年8月至2012年3月,采用MIPPO技术治疗胫骨长节段粉碎骨折30例.结果 全部病例获得随访,随访时间1~2年,平均1.5年.30例骨折均愈合.临床愈合时间12~24周(平均16周),无感染、畸形愈合及内固定失效等并发症.按Johner-Wruhs 评分标准,优17例,良10例,可3例,优良率90%.结论 MIPPO治疗胫骨长节段粉碎骨折具有创伤小、固定确实、感染率低、骨折愈合率高等优点,值得临床推广应用.
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    锁定加压钢板在中青年桡骨远端关节内粉碎性骨折中的应用
    钱军,李桂平,徐文星,谢彰凯,庄勤林
    2013 (3):  164-168.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.013
    摘要 ( 281 )  
    目的 探讨中青年桡骨远端骨折的临床特点,及锁定加压钢板在桡骨远端关节内粉碎性骨折中的应用效果.方法 2008年2月到2010年6月,对25例桡骨远端关节内粉碎性骨折患者(20~50岁)进行切开复位LCP内固定,术后早期功能锻炼.结果 25例患者均获得随访,随访6~20个月,平均12个月.所有患者掌倾角、尺偏角、桡骨短缩程度、关节面台阶等均得到整复,骨折平均愈合时间为44d,术后6周时腕关节活动度达到正常的80%以上.术后并发腕管综合征1例,无肌腱炎及肌腱断裂,无创伤性关节炎.最终疗效根据Dienst腕关节功能评估标准进行评定:优22例,良2例,可1例.结论 中青年桡骨远端关节内粉碎性骨折常为高能量损伤,多为不稳定骨折,早期切开复位LCP内固定可获得较满意的临床疗效.
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    关节镜下内侧半月板囊肿13例治疗体会
    张志强,何彦国,陈超,田峰,张洪美
    2013 (3):  169-170.  DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2013.03.014
    摘要 ( 317 )  
    目的 探讨关节镜治疗内侧半月板囊肿的临床疗效.方法 2011年6月至2013年1月,我科采用关节镜治疗内侧半月板囊肿13例,术后随访3个月,观察治疗前后Lysholm膝关节功能评分变化及临床疗效.结果 术前Lysholm评分为49~77分,平均68.2±2.4分,术后为86~95分,平均91.1±1.7分,术后评分明显高于术前(P<0.05);根据Sarimo标准,本组中优10例,良3例,优良率100%.结论 采用关节镜治疗内侧半月板囊肿,取代了传统的大切口囊肿及内侧半月板全切,最大程度地保留了正常半月板,并可同时行半月板损伤修复,术后疗效好,膝关节功能恢复好,值得临床推广应用.
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