内科理论与实践

内科理论与实践 ›› 2015, Vol. 10 ›› Issue (03): 188-192.doi: 10.16138/j.1673-6087.a0260

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蟾毒灵诱导伯基特淋巴瘤细胞凋亡及初步机制研究

张楠, 于文君, 韦炜, 阎骅,   

  1. 上海交通大学医学院附属瑞金医院血液科;
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要： 目的 :探讨蟾毒灵(bufalin)对伯基特(Burkitt)淋巴瘤细胞的影响。方法:体外培养人伯基特淋巴瘤细胞株Daudi,以0、5、10、20、40、80 nmol/L浓度蟾毒灵处理细胞,细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞抑制率,膜联蛋白(annexin)Ⅴ/碘化丙啶(PI)双染后,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质印迹(Western blotting)检测凋亡相关蛋白胱天蛋白酶及B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、c-Myc的变化,实时定量(real-time)PCR检测c-Myc RNA水平的变化。结果:CCK-8检测结果显示,蟾毒灵对Daudi细胞增殖有明显的抑制作用,呈药物浓度依赖性,且经48 h处理后的抑制率明显高于24 h,半数抑制浓度(IC50)为(20.03±2.56)nmol/L;流式细胞检测结果表明,蟾毒灵可诱导Daudi细胞发生凋亡;蛋白质印迹检测结果显示,不同浓度蟾毒灵处理Daudi细胞48 h后,胱天蛋白酶3、9及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)均出现明显剪切,并伴有Bcl-2及c-Myc癌基因的下调;实时定量PCR检测显示,c-Myc癌基因在m RNA水平也出现明显下调。结论:蟾毒灵能够诱导Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株发生凋亡,下调的c-Myc及Bcl-2癌基因可能参与了这一过程。

关键词: Burkitt淋巴瘤, 蟾毒灵, 细胞凋亡, c-Myc癌基因

Key words: Burkitt lymphoma, Bufalin, Cell apoptosis, c-Myc oncogene