内科理论与实践

内科理论与实践 ›› 2008, Vol. 3 ›› Issue (02): 118-122.doi: 10.16138/j.1673-6087.a1226

• 论文 • 上一篇    下一篇

纤维蛋白原α链剪切位点IVS2+1G>C突变导致的遗传性低纤维蛋白原血症

陈华云, 杨芳, 许冠群, 张利伟, 戴菁, 丁秋兰, 奚晓东, 王学锋, 王鸿利,   

  1. 上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科,上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所,上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科,上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科,上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科,上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科,上海交通大学医学院附属瑞金医院基因组学国家重点实验室,上海交通大学医学院附属瑞金医院临床输血科,上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所 上海200025,上海200025,上海200025,上海200025,上海200025,上海200025,上海200025,上海200025,上海200025
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要： 目的:探讨遗传性低纤维蛋白原(Fg)血症的分子发病机制。方法:检测凝血指标以明确诊断;用DNA直接测序法对患者Fg基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列进行测序以寻找基因突变,对有突变的序列反向测序证实;通过逆转录结合巢式PCR扩增的方法,检测患者外周血中的Fg异位转录产物;构建含有突变点的突变型FGA小基因(minigene)质粒和野生型FGA小基因质粒,将2种质粒分别转染人胚肾(HEK)293T细胞,抽提RNA,逆转录PCR(RT-PCR)后TA克隆测序。结果:先证者呈FGA基因剪切位点IVS2+1G>C杂合突变;对于该突变,逆转录结合巢式PCR的产物经克隆后测序只检测到正常转录本,而没有发现异常转录本;突变型FGA小基因质粒转染HEK293T细胞后,抽提RNA再经RT-PCR、TA克隆、测序,揭示剪接过程中发生了FGA基因2号内含子滞留,导致终止密码的提前出现,从而使异常转录的mRNA在体内很快被降解。结论:异位转录结合体外表达证明先证者FGA基因剪切位点IVS2+1G>C突变导致异常转录mRNA在体内很快被降解,是先证者低Fg血症的原因之一。

关键词: 遗传性疾病, 纤维蛋白原, 基因突变, 异位转录

Key words: Hereditary disease, Fibrinogen, Gene mutation, Ectopic transcripts