外科理论与实践

外科理论与实践 ›› 2005, Vol. 10 ›› Issue (03): 248-251.doi: 10.16139/j.1007-9610.a1417

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核转录因子-κB-圈套抑制血管内皮细胞核转录因子-κB激活机制的探讨

李磊,汤耀卿,纪玉宝,毛恩强,瞿洪平,张圣道   

  1. 上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所,上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所 上海200025 ,上海200025 ,上海200025 ,上海200025 ,上海200025 ,上海200025
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要： 目的:观察核转录因子(NF)-κB圈套(decoy)对脂多糖(LPS)刺激后人脐静脉内皮细胞NF-κB激活的抑制作用,并就其作用机制进行探讨。方法:获取和培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),平均分成4组。NF-κB-圈套组和错配-圈套组分别预先以NF-κB-圈套-Lipofectamine2000复合物和错配-圈套-Lipofectamine2000复合物(对照组)处理,LPS组和对照组分别加入同体积的培养液,观察荧光标记DNA转染细胞情况。用10μg/mlLPS刺激2h激活NF-κB,收集细胞,分别提取细胞核蛋白,检测不同组NF-κB活性以及P65和P50亚基蛋白质含量。结果:转染5h后大于90%细胞核内可观察到绿色荧光。NF-κB-圈套组NF-κBP65亚基活性显著低于错配-圈套组和LPS组,但P65和P50亚基蛋白质含量两组之间无显著差异。结论:NF-κB-圈套能抑制细胞核内NF-κB的DNA结合活性,这一作用可能是NF-κB-圈套转入细胞核后占据转录因子核定位区的结果。

关键词: 炎症, 核因子-κB, 圈套, 细胞因子, 脂多糖

Key words: Inflammatory response, Nuclear factor-kB, Decoy, Cytokines, Lipopolysaccharide, Mechanism