诊断学理论与实践 ›› 2006, Vol. 5 ›› Issue (01): 52-55.doi: 10.16150/j.1671-2870.a1148

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流式细胞术结合G418筛选重组质粒稳定转染细胞

王海嵘, 顾春红, 钟济华, 王婷, 韩洁英, 陈芳源, 欧阳仁荣,   

  1. 上海交通大学医学院附属仁济医院血液科上海血液学研究所,上海交通大学医学院附属仁济医院血液科上海血液学研究所,上海交通大学医学院附属仁济医院血液科上海血液学研究所,上海交通大学医学院附属仁济医院血液科上海血液学研究所,上海交通大学医学院附属仁济医院血液科上海血液学研究所,上海交通大学医学院附属仁济医院血液科上海血液学研究所,上海交通大学医学院附属仁济医院血液科上海血液学研究所 上海200001,上海200001,上海200001,上海200001,上海200001,上海200001,上海200001
  • 出版日期:2006-02-25 发布日期:2006-02-25

  • Online:2006-02-25 Published:2006-02-25

摘要: 目的:探索优化重组质粒转染细胞后的筛选方法,以得到高纯度U937转染细胞。方法:选择带Neor及GFP基因的质粒pRNATU6.1/Neo。根据流式细胞仪可分选GFP阳性细胞这一特点,在质粒转染细胞后比较单用G418筛选与合并使用流式细胞仪分选后的筛选效果。结果:单用G418筛选时最高筛选效率为72.0%;合并使用G418及流式细胞仪分选后的筛选效率均在90.0%以上。结论:合并使用G418及流式细胞仪分选是一种高效的筛选方法。

关键词: 质粒, GFP, G418, 流式细胞术

Key words: Plasmid, GFP, G418, Flow cytomety