外科理论与实践

外科理论与实践 ›› 2008, Vol. 13 ›› Issue (02): 133-136.doi: 10.16139/j.1007-9610.a1994

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小RNA干扰VEGF-C基因表达对乳腺癌细胞增殖及凋亡的体外研究

顾斐, 邹强, 倪泉兴,   

  1. 复旦大学附属华山医院外科,复旦大学附属华山医院外科,复旦大学附属华山医院外科 上海200040,上海200040,上海200040
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要： 目的:利用质粒pSilencer3.0-H1构建人血管内皮生长因子-C(VEGF-C)基因经小RNA干扰(siRNA)的表达载体,体外研究其对人乳腺癌细胞MDA-MB-435的增殖及凋亡作用,为乳腺癌VEGF-C基因靶向RNA干扰治疗的可行性作初步探讨。方法:构建3组针对VEGF-C的pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA表达载体和1组阴性对照序列。测序鉴定后,将脂质体介导转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435。用RT-PCR和Western Blot检测转染前后VEGF-C基因的表达。挑选干扰效率最强的一组表达载体。以MTT法和流式细胞仪检测经siRNA干扰的VEGF-C对人乳腺癌细胞MDA-MB-435的体外作用。结果:经测序鉴定,VEGF-C基因的siRNA表达载体构建成功,转染人乳腺癌细胞MDA-MB-435后,检测显示VEGF-C基因和蛋白水平表达量明显降低,抑制率最高达85.4%,细胞体外生长缓慢,72h后凋亡率达60%。结论:针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体能抑制VEGF-C的基因表达,促进了人乳腺癌细胞MDA-MB-435的凋亡,可进一步发挥治疗作用。

关键词: 乳腺肿瘤, 血管内皮生长因子-C, RNA干扰, 基因表达

Key words: Breast neoplasms, Vascular endthelial grouth factoe-c, Small interfering RNA, Gene expression