外科理论与实践 ›› 2017, Vol. 22 ›› Issue (01): 49-56.doi: 10.16139/j.1007-9610.a3502
金薇, 罗祎, 刘溦薇, 陈国庆, 周鸣,
摘要： 目的:探讨microRNA-130b(miR-130b)的表达差异对三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)MDA-MB-231细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及机制。方法 :通过Lipofectamine TM 2000将miR-130b抑制剂或模拟物及阴性对照转染到MDA-MB-231细胞中。应用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miR-130b表达和转染效率。应用MTT实验、克隆形成实验、划痕实验以及transwell实验,检测miR-130b模拟物或抑制剂对MDA-MB-231细胞功能影响。应用生物信息学网站寻找miR-130b可能的靶基因。应用双荧光素酶载体实验验证预测的靶基因,并通过qRT-PCR以及Western印迹实验进一步证实。结果:MDA-MB-231细胞转染miR-130b抑制剂或模拟物。与阴性对照组相比,模拟物组miR-130b的表达显著升高,抑制剂组miR-130b的表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.01)。与阴性对照组相比,模拟物组细胞增殖(P<0.05)、克隆形成(P<0.05)、侵袭(P<0.01)及迁移(划痕试验P<0.05,transwell试验P<0.05)能力明显增高。相反,抑制剂组细胞增殖(P<0.05)、克隆形成(P<0.05)、侵袭及迁移(划痕试验P<0.05,transwell试验P0.05);但CYLD蛋白表达在抑制剂组明显上调,模拟物组的表达明显下降(P
