内科理论与实践 ›› 2018, Vol. 13 ›› Issue (03): 175-180.doi: 10.16138/j.1673-6087.a1207
石晓东, 戴钰俊, 杨莹, 王盼盼, 王月英,
摘要： 目的:检测DNA甲基转移酶3A(DNA methyltransferase 3A,DNMT3A)突变的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者原代细胞中编码哺乳动物西罗莫司靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)基因的甲基化变化及基因表达情况,并研究西罗莫司靶向治疗该类AML肿瘤细胞的效果。方法:收集有DNMT3A突变及无DNMT3A突变的AML患者原代骨髓细胞,通过重硫酸盐测序(bisulfite genomic sequence,BSP)法、实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-q PCR)法分别检测m TOR的甲基化变化和基因表达变化,借助细胞增殖检测试剂盒(cell counting Kit-8,CCK-8)及凋亡试剂盒异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)检测用西罗莫司处理前后有DNMT3A突变及无DNMT3A突变的肿瘤细胞的增殖及凋亡情况。结果:DNMT3A突变的AML患者原代细胞中m TOR的甲基化降低且基因表达上调(P<0.05),西罗莫司可有效抑制DNMT3A突变的原代肿瘤细胞的增殖并引起其凋亡(P<0.05)。结论:与无DNMT3A突变的AML原代肿瘤细胞相比,西罗莫司可靶向mTOR抑制DNMT3A突变相关的AML原代肿瘤细胞的增殖,促使其凋亡,为进一步的临床用药提供了证据。
