内科理论与实践 ›› 2020, Vol. 15 ›› Issue (01): 49-52.doi: 10.16138/j.1673-6087.a0405

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法尼醇在促氟康唑耐药白念珠菌凋亡中的作用机制

周罗成, 王宁, 朱莹莹, 张姣姣, 王海嵘, 康健,   

  1. 上海交通大学医学院附属新华医院急诊医学科;
  • 发布日期:2020-02-25

  • Published:2020-02-25

摘要: 目的:初步探讨法尼醇促进氟康唑耐药白念珠菌凋亡的可能机制。方法 :采用药物浓度梯度法构建氟康唑耐药的白念珠菌株,经鉴定后设为氟康唑耐药组;氟康唑敏感的白念珠菌株作为对照组。在2组中加入终浓度为200μmol/L的法尼醇,孵育24 h后采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl tetrazolium,MTT法)比色法检测加入法尼醇后氟康唑耐药与敏感白念珠菌的增殖情况。应用流式细胞仪、激光共聚焦显微镜等,检测并比较2组菌株的胱天蛋白酶3(caspase 3)的活化程度、菌株内还原型谷胱甘肽的含量及细胞内活性氧类(reactive oxygen species,ROS)含量,进而比较不同组菌株在细胞凋亡、细胞内氧化还原及氧化应激水平上的差异。结果:与对照组比较,加入法尼醇后,氟康唑耐药的白念珠菌株增殖下降,其差异具有统计学意义(P=0.005 7)。氟康唑耐药组白念珠菌内的还原型谷胱甘肽的含量下降,细胞内ROS含量及胱天蛋白酶3活性上升,且差异均具有统计学意义(分别P=0.011、P=0.023、P=0.036)。结论:法尼醇通过减少耐药菌株细胞内还原型谷胱甘肽的含量,增加胞内ROS含量,增强胱天蛋白酶3活性,使耐药白念珠菌抗氧化能力下降并促使真菌发生细胞凋亡。

关键词: 法尼醇, 氟康唑, 白念珠菌, 胱天蛋白酶, 还原型谷胱甘肽, 活性氧类

Key words: Farnesol, Fluconazole, Candida albicans, Cystease 3, Reduced glutathione, Reactive oxygen species