外科理论与实践

外科理论与实践 ›› 2014, Vol. 19 ›› Issue (04): 329-334.doi: 10.16139/j.1007-9610.a3167

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自噬在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡中的作用

付志平, 杨卫平, 李科, 景晓乾, 汪炳瑞, 沈柏用, 彭承宏, 邱伟华,   

  1. 上海交通大学医学院附属瑞金医院外科,上海消化外科研究所;
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要： 目的:研究自噬在吉西他滨(gemcitabine,Gem)诱导胰腺癌细胞SW1990凋亡中的作用,并以氯喹特异性抑制自噬,以探讨其可能机制。方法:采用CCK8法检测Gem对胰腺癌细胞增殖的影响,并用实时定量PCR检测自噬相关基因LC3的表达,以p62免疫荧光染色检测细胞内自噬泡,通过Western印迹法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin 1的表达,并用AnnexinⅤ/PI流式细胞方法检测Gem诱导后细胞凋亡的变化。进一步通过氯喹抑制自噬,检测自噬抑制前后细胞增殖、自噬及凋亡的变化。结果:Gem对胰腺癌细胞SW1990增殖具有部分抑制作用,Gem作用能迅速激活细胞自噬从而产生耐药。LC3的mRNA表达升高1.4~2.2倍(P<0.05),LC3-Ⅱ蛋白水平升高1.5~2.7倍(P<0.05)。Gem和氯喹联合用药组较Gem单药组细胞凋亡蛋白Caspase-3表达升高,细胞存活率从64.3%±3.1%降低为35.2%±3.4%(P<0.05)。结论:自噬在Gem诱导胰腺癌细胞凋亡的过程中可能起到保护作用,氯喹抑制自噬后可增强Gem的促凋亡作用。

关键词: 胰腺癌细胞, 自噬, 吉西他滨, 凋亡

Key words: Pancreatic cancer cell, Autophagy, Gemcitabine, Apoptosis