诊断学理论与实践

诊断学理论与实践 ›› 2007, Vol. 6 ›› Issue (01): 46-50.doi: 10.16150/j.1671-2870.a2376

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激光捕获显微切割结合定量PCR检测NES1 mRNA在胃癌中的表达及其甲基化状态

黄玮, 田相龙, 钟捷, 吴云林, 李彪,   

  1. 上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,上海交通大学医学院附属瑞金医院消化科,上海交通大学医学院附属瑞金医院核医学科 上海200025,上海200025,上海200025 上海200025,上海200025
  • 出版日期:2007-02-25 发布日期:2007-02-25

  • Online:2007-02-25 Published:2007-02-25

摘要： 目的:探讨正常上皮细胞特异性-1基因(NES1)在正常胃组织及胃癌组织中的表达和受甲基化调控的影响。方法:利用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术分离胃癌患者活检组织中的癌细胞和正常上皮细胞,采用荧光定量PCR检测其中NES1 mRNA的表达,甲基化特异性PCR观察NES1基因外显子3 CpG岛甲基化状态。结果:荧光定量PCR结果显示,NES1 mRNA在胃癌细胞中的表达明显低于正常胃上皮细胞(P＜0．05)。甲基化特异性PCR检测胃癌组织癌细胞中NES1外显子3 CpG岛甲基化状态发现,大部分肿瘤患者NES1外显子3 CpG岛均存在不同程度甲基化,其中完全甲基化7例(33．3%),不完全甲基化12例(57．14%);而正常细胞中存在不完全甲基化仅为1例(5%),其余19例均不存在甲基化(95%)。结论:激光显微切割结合荧光定量PCR技术可较精确地检测NES1在胃癌组织细胞和正常组织细胞中的表达。NES1在胃癌中表达降低,其表达降低与NES1基因外显子3甲基化有关。

关键词: 胃癌, NES1基因, 激光捕获显微切割, 甲基化

Key words: Gastric cancer,NES1 gene, Laser capture microdissection,Methylation