内科理论与实践

内科理论与实践 ›› 2010, Vol. 5 ›› Issue (01): 62-67.doi: 10.16138/j.1673-6087.a0157

• 论文 • 上一篇    下一篇

Lin28对胃腺癌细胞株增殖周期的影响及机制

罗玄, 吴云林, 冯立新,   

  1. 上海交通大学医学院附属瑞金医院消化内科;上海交通大学医学科学研究院干细胞分化研究室;
  • 发布日期:2020-07-25

  • Published:2020-07-25

摘要： 目的:通过检测可以调控微小RNA(microRNA)生成的RNA结合蛋白Lin28在不同分化程度胃腺癌细胞中的表达水平,探讨了Lin28对胃癌细胞周期的影响及其可能的机制。方法:用RT-PCR法在RNA水平检测Lin28的表达,免疫荧光染色分析Lin28蛋白和人细胞角蛋白18(CK-18)在细胞中的共表达情况,分别应用RNA干扰技术敲减Lin28,及细胞转染技术过表达Lin28,比较Lin28表达水平变化前后细胞周期调控相关蛋白的变化情况,碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色检测细胞周期变化。结果:Lin28在高分化胃腺癌细胞株MKN28中的RNA和蛋白水平均低表达,而在低分化胃腺癌细胞株MKN45中均高表达;Lin28与肿瘤干细胞的常见标志物CK-18共表达于极少数胃癌细胞中;敲减了Lin28的MKN45细胞株S期则明显增加,而G1期比对照组相应地减少。相反,Lin28过表达导致S期明显减少,而G1期比对照组相应增加。Westernblot检测发现,敲减了Lin28的MKN45细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)蛋白发生明显的上调,抑制其活性的蛋白p21和p27水平降低;而MKN28获得Lin28后,CDK2水平有所下调,p21和p27表达水平上调。结论:Lin28参与胃癌细胞分化和细胞周期相关的调控,且对细胞周期抑制蛋白p21/CDK2,p27/CDK2也发挥着一定的调节作用。

关键词: Lin28, 胃腺癌细胞, 细胞周期, 人细胞角蛋白18

Key words: Lin28, Gastric carcinoma cell, Cell cycle, Cytokeratin 18